flag抗體A01868是一段親水性八氨基酸短肽，其分子質(zhì)量約為1.0KDa?？贵w可以通過(guò)基因重組技術(shù)添加到蛋白質(zhì)的N端或C端，由于flag抗體的尺寸小，親水性強(qiáng)，不會(huì)對(duì)蛋白表達(dá)、蛋白水解成熟、抗原性等造成影響。

　　

　　flag抗體A01868的鑒定：

　　

　　由蛋白濃度的測(cè)定公式求得蛋白濃度：A280nm×1.45-A260nm×0.74=蛋白濃度（mg/mL）；單抗純化后，根據(jù)純化前后體積，推算出腹水中蛋白含量。

　　

　　單抗相對(duì)親和力測(cè)定：

　　

　　以合成的包被原400ng/孔包被酶標(biāo)板，按行分別加入按一定濃度倍比稀釋的純化單抗，37℃溫育30min，洗滌；加入酶標(biāo)二抗，37℃溫育30min，洗滌；加底物顯色20min，加終止液終止反應(yīng)，雙波長(zhǎng)掃描測(cè)定吸光值。

　　

　　以單抗?jié)舛葹闄M坐標(biāo)，以所對(duì)應(yīng)的OD值為縱坐標(biāo)作圖，根據(jù)反應(yīng)曲線(xiàn)分析單克隆抗體的相對(duì)親和力。

　　

　　以抗體濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，以所對(duì)應(yīng)的OD值為縱坐標(biāo)作圖，得一曲線(xiàn)，取曲線(xiàn)上OD值的50%所對(duì)應(yīng)的橫坐標(biāo)為該抗體的稀釋度，算出該抗體總的稀釋度后，計(jì)算親和常數(shù)。親和常數(shù)計(jì)算公式：親和常數(shù)K=160000(抗體分子量)/抗體稀釋度×抗體濃度(mg/ml)

　　

　　flag抗體A01868能夠特異性的與標(biāo)簽蛋白上的flag標(biāo)簽結(jié)合，能夠用于標(biāo)簽蛋白的純化、定性定量檢測(cè)蛋白表達(dá)水平、細(xì)胞內(nèi)定位等實(shí)驗(yàn)。