干擾慢病毒包被(三保一)：5998元/套 18個(gè)自然日

敲除慢病毒包被(三保一)：5998元/套 18個(gè)自然日

過(guò)表達(dá)慢病毒包被：12個(gè)自然日起

準(zhǔn)現(xiàn)貨:2800元

0-1000bp:3500元

1000-2000bp:3900元

2000-3000bp:4400元

制定序列敲除/干擾慢病毒包被：1998元/個(gè) 18個(gè)自然日

慢病毒使用說(shuō)明

準(zhǔn)備貼壁細(xì)胞：

第1天,在24孔培養(yǎng)板(以此為例)接種若干孔,每個(gè)孔內(nèi)接種3~5×10的4次方個(gè)目的細(xì)胞，以便進(jìn)行病毒感染時(shí)細(xì)胞的融合度約為70%。

第2天，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如細(xì)胞狀態(tài)較好則開(kāi)始侵染。

病毒侵染：取出-80C的儲(chǔ)存的病毒，在冰上融化后，瞬時(shí)離心。使用含血清、不含抗生素的培養(yǎng)基，根據(jù)MOI配制慢病毒稀釋液（可設(shè)置不同MOI）。根據(jù)需要添加Polybrene，添加時(shí)需要設(shè)置合適的濃度吸去原細(xì)胞培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)基，添加配制好的慢病毒稀釋液。混勻后放于二氧化碳培養(yǎng)箱（37°C、5%的二氧化碳)孵育過(guò)夜。

去除病毒：

第3天，更換培養(yǎng)液。一般在24小時(shí)候內(nèi)將含有慢病毒的培養(yǎng)液更換成正常培養(yǎng)液；如果侵染對(duì)細(xì)胞有明顯毒性作用而影響細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，可以在8-12小時(shí)更換培養(yǎng)液。

檢測(cè)結(jié)果：

第4天，帶熒光標(biāo)簽的慢病毒可通過(guò)倒置熒光顯微鏡進(jìn)行侵染效果評(píng)估；帶螢火蟲(chóng)熒光素酶標(biāo)簽的病毒可通過(guò)熒光素酶實(shí)驗(yàn)進(jìn)行侵染效果評(píng)估：也可通過(guò)qPCR或WB進(jìn)行侵染效果評(píng)估。